Staphylococcus aureus merupakan bakteri patogen yang dapat menimbulkan gangguan kesehatan masyarakat, karena bakteri tersebut sering mencemari produk asal hewan, termasuk susu atau biasa dikenal dengan milkborne disease (MBD). Bakteri patogen oportunistik ini dapat ditemukan pada hewan dan manusia. Bakteri ini dapat menyebabkan berbagai penyakit mulai dari infeksi kulit ringan hingga sistemik seperti pneumonia, artritis, dan meningitis. S. aureus banyak ditemukan pada kulit dan mukosa ternak, terutama sapi perah dengan mastitis subklinis atau klinis, yang merupakan sumber kontaminasi pada susu. Jika bakteri ini resisten terhadap antibiotik beta-laktam disebut sebagai methicillin-resistant S. aureus (MRSA).
Diketahui bahwa MRSA dapat mengakibatkan masalah kesehatan baru bagi manusia dan hewan. Tingginya tingkat kontaminasi MRSA di peternakan sapi perah karena pemberian antibiotik yang berlebihan dalam pengobatan sapi perah dan penyebaran bakteri ini tidak dapat lepas dari pengelolaan sanitasi pada saat pemerahan. Pencemaran dapat terjadi dari susu yang terkumpul dari ambing maupun dari tangan peternak selama proses pemerahan. Kabupaten Probolinggo, tepatnya di Kecamatan Krucil, merupakan salah satu penghasil susu terbesar sentra produksi di Indonesia. Antibiotik telah banyak digunakan sebagai pengobatan pada kasus infeksi pada sapi perah di Probolinggo, terutama pada kasus mastitis, sehingga kemungkinan terjadi kontaminasi MRSA pada peternakan sapi perah di Probolinggo.
Tujuan dari studi ini adalah untuk mengetahui tingkat kontaminasi MRSA pada susu sapi perah dan susu sapi perah di Probolinggo, Indonesia, serta membandingkan metode deteksi fenotip menggunakan skrining dengan cakram difusi oksasilin dan cefoksitin, ORSAB, dan konfirmasi genotipe menggunakan PCR untuk mendeteksi gen penyandi mecA. Sensitivitas dan spesifisitas uji menunjukkan efektivitas dan kemudahan penerapan metode deteksi MRSA.
Masalah kejadian infeksi S. aureus terus berkembang dengan munculnya MRSA yang resisten terhadap semua antibiotik beta-laktam, termasuk monobaktam dan sefalosporin, yang merupakan kelompok antibiotik yang sering digunakan untuk mengobati infeksi Staphylococcus. Infeksi MRSA menyebabkan masalah kesulitan pengobatan, sehingga diagnosis cepat dan dini diperlukan untuk mengidentifikasi MRSA secara akurat. Dalam studi ini, 42 sampel (52,5%) S. aureus ditemukan resisten terhadap cakram oksasilin, dan 10 sampel (12,5%) ) ke disk cefoxitin. Identifikasi MRSA dengan difusi cakram masih banyak digunakan karena dapat dilakukan dengan cepat dan dengan biaya yang lebih murah. Disk difusi menggunakan oksasilin dan cefoxitin memiliki tingkat sensitivitas yang sama yaitu 100%, dan spesifisitas sebesar 74,07% untuk oksasilin. dan 92,59% untuk cefoxitin. Namun, beberapa penelitian sebelumnya melaporkan bahwa penggunaan metode difusi cakram cefoxitin memiliki tingkat sensitivitas yang lebih baik daripada oksasilin dalam mendeteksi MRSA, karena metode difusi cakram oksasilin masih memiliki tingkat positif palsu yang tinggi. False positive dapat dipengaruhi oleh hiperproduksi beta-laktamase, yang menghasilkan ekspresi fenotip resistensi oksasilin tetapi tanpa mekanisme resistensi genotipik.
Pada studi ini, semua isolat yang terdeteksi resisten terhadap cawan cefoxitin dan oxacillin. Semua isolat yang terdeteksi resisten terhadap oksasilin dan cefoxitin dikonfirmasi dengan uji ORSAB, memiliki spesifisitas 100%. Pada penelitian ini, 20 dari 42 isolat (47,62%) ditemukan positif MRSA. Tingkat sensitivitas mengkonfirmasi galur resistensi yang sedang diuji sementara spesifisitasnya adalah pada konsentrasi penghambatan minimum (MIC). Isolat S. aureus yang resisten terhadap Cefoxitin dan ORSAB-positif diuji secara genotip menggunakan PCR untuk mendeteksi keberadaan gen yang mengkode mecA; isolat ini juga memiliki hasil positif pada semua metode fenotipik (ketahanan terhadap cefoxitin dan oxacillin pada metode difusi cakram dan hasil positif pada uji ORSAB). Antibiotik cefoxitin merupakan penginduksi yang baik untuk ekspresi gen mecA karena dapat meningkatkan ekspresi PBP2a yang dikodekan oleh gen mecA.
Dari studi ini dapat disimpulkan bahwa terjadinya kontaminasi MRSA pada susu dapat disebabkan oleh berbagai faktor antara lain tangan peternak yang tidak higienis saat pemerahan. Kontaminasi MRSA menimbulkan risiko kesehatan masyarakat yang serius, yang meningkatkan potensi penyebaran penyakit dan kesulitan untuk mengobati stafilokokus. Oleh karena itu, pemeriksaan laboratorium mikrobiologi sangat penting untuk mengisolasi dan mengidentifikasi isolat MRSA secara cepat, akurat, dan hemat biaya dari sampel pangan asal hewan. Deteksi genotipik menggunakan PCR untuk mendeteksi keberadaan gen penyandi mecA adalah tes MRSA yang akurat secara molekuler; namun pada laboratorium yang tidak dapat melakukan pengujian molekuler, metode difusi cakram cefoxitin dapat digunakan untuk mendeteksi MRSA. Hal ini didasarkan pada kemampuan uji difusi cakram cefoxitin dalam mendeteksi ekspresi gen mecA yang dapat lebih efektif dan metode skrining MRSA yang efisien.
Studi ini menunjukkan bahwa beberapa isolat S. aureus bersifat Methicillin-Resistant S. aureus (MRSA) dan memiliki gen penyandi mecA di peternakan sapi perah. Penyebaran S. aureus yang merupakan MRSA dapat menjadi ancaman bagi kesehatan masyarakat. Dengan demikian, diperlukan tindakan pencegahan dan pengendalian untuk menekan penyebaran infeksi S. aureus pada peternakan sapi perah di Probolinggo, Jawa Timur, Indonesia.
Penulis korespondensi: Prof. Dr. Mustofa Helmi Effendi, drh., DTAPH
Informasi detail dari riset ini dapat dilihat pada tulisan kami di:
Rafif Khairullah A, Rehman S, Agus Sudjarwo S et al. Detection of mecA gene and methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolated from milk and risk factors from farms in Probolinggo, Indonesia. F1000Research 2022, 11:722
