Propolis adalah bahan yang hemat biaya efek samping minimal.1 Propolis juga merupakan resin dihasilkan oleh lebah madu Tetragonula yang tidak menyengat biroi (T. biroi) yang berasal dari Sulawesi. Propolis dari lebah tak bersengat Sulawesi, T. biroi, memiliki kandungan flavonoid tertinggi dibandingkan yaitu lebah Apis mellifera.2 Propolis terdiri dari lilin, resin, minyak atsiri, serbuk sari, dan organik komponen.3 Resin mengandung fenol, flavonoid, dan berbagai bentuk asam. Flavonoid adalah senyawa paling umum yang terkandung dalam propolis. Flavonoid, yang merupakan senyawa turunan dari kelompok polifenol, bertindak sebagai antioksidan, antivirus, antibakteri, antiradang, dan antijamur.4 Namun, biokompatibilitas propolis asal lebah tak bersengat Sulawesi masih kekurangan pemeriksaan lebih lanjut.
Propolis memiliki kapasitas antioksidan yang kuat karena mengandung flavonoid dan quercetin, yang memiliki sifat anti-inflamasi yang kuat. Flavonoid merangsang pelepasan sinyal molekul; mereka dianggap berharga sebagai biomaterial yang digunakan dalam regenerasi tulang. Propolis mengandung flavonoid yang menghambat kerusakan sel disebabkan oleh hidrogen peroksida dengan menghilangkan bebas radikal dan melindungi membran sel terhadap lipid peroksidasi.5 Dalam bidang kedokteran gigi, propolis merupakan suatu bahan yang mempunyai banyak manfaat. Sel dan jaringan tanggapan adalah kunci keberhasilan biomaterial desain dan aplikasi dalam kedokteran gigi. Satu metode untuk menyelidiki respons sel dan jaringan adalah melalui pengujian sitotoksisitas in vitro dengan mengukur viabilitas sel dalam kultur sel.6 Untuk menyelidiki levelnya toksisitas zat kimia, hal ini diperlukan untuk melakukan uji sitotoksisitas. Salah satu yang paling banyak Uji sitotoksisitas yang banyak digunakan adalah Mikrokultur Uji Teknik Tetrazolium (MTT).
Dalam hal ini metode, garam kuning MTT tetrazolium direduksi oleh sel hidup menjadi kristal formazan ungu.7 The Parameter yang diperoleh adalah konsentrasi penghambatan (IC50) yang menyatakan nilai konsentrasi yang menghasilkan penghambatan 50% proliferasi sel, dengan demikian menunjukkan potensi toksisitas a senyawa pada sel. Kultur sel osteoblas adalah sebuah model uji in vitro yang ideal untuk biokompatibilitas dan pengujian osseointegrasi. Dalam penelitian ini, sel preosteoblas 7F2 digunakan, yang dikultur secara in vitro. Sel 7F2 digunakan karena ini sel terkait dengan osteoblas dewasa, dan mereka mengekspresikan alkaline fosfatase dan mengeluarkan tipe I kolagen. Sel 7F2 mengandung sel yang homogen populasi yang terkait dengan osteoblas dewasa dan nomor bagian yang lebih stabil dibandingkan dengan yang lain garis sel osteoblas, seperti calvaria tikus 3T3-E1 (MC3T3-E1).8 Properti unik dari 7F2 adalah itu mewakili tahap baru diferensiasi osteoblas. Osteoblas adalah sel yang bertanggung jawab untuk proses pembentukan tulang. Proliferasi mereka dan diferensiasi memainkan peran penting dalam proses tersebut osteogenesis.9,10 Hipotesis penelitian ini apakah itu ekstrak nanoemulsi propolis (PNE) 1% memiliki biokompatibilitas dan viabilitas yang baik dengan 7F2 pra-osteoblas. Berdasarkan pertanyaan penelitian di atas, tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis kelangsungan hidup garis sel pra-osteoblas 1% 7F2 setelah aplikasi in vitro 1% PNE (T. biroi) dari Sulawesi.
Dalam penelitian ini, garis sel pra-osteoblas 7F2 yang dapat diinduksi dan berdiferensiasi menjadi sel-sel osteoblas digunakan. Sel pra-osteoblas 7F2 ini diobati dengan PNE 1% dengan tujuan menentukan sitotoksisitas dengan berbagai konsentrasi yang digunakan. Jika viabilitas sel preosteoblas tetap terjaga, cairan MTT berwarna kuning akan berubah menjadi ungu; ini dapat dilihat pada Gambar 3“6. Jika persentase viabilitas sel kurang dari 70%, maka materi yang terkena sel akan menjadi beracun. Hasil uji MTT terhadap viabilitas sel pra-osteoblas 7F2 ditunjukkan pada Tabel 1.Hasil viabilitas sel seperti terlihat pada Tabel 1, menunjukkan bahwa viabilitas tertinggi pada hari ke 1 7F2 sel pra-osteoblas berada pada konsentrasi 0,78% (81,05%), sedangkan yang terendah terdapat pada konsentrasi sebesar 100% (0,83%). Terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok pada hari 1 (p <0,05) Setelah penerapan MTT, bacaan dilakukan dengan menggunakan pembaca ELISA dengan panjang gelombang 540 nm.
Lalu, hasil bacaannya berupa nilai serapan (OD) tersebut dinyatakan dalam persentase menggunakan rumus ini:
% kelayakan = Grup Perawatan AER x 100%
Sel Kontrol AER
AER : Absorbansi menggunakan ELISA Reader setelah pemberian PNE 1% pada hari ke 1. L
Hasil viabilitas sel seperti terlihat pada Tabel 2 menunjukkan viabilitas tertinggi pada hari ke 3 Sel pra-osteoblas 7F2 berada pada konsentrasi sebesar 0,78% (92,15%), sedangkan terendah pada konsentrasi 100% (1,4%). Ada berbeda nyata antar kelompok konsentrasi pada hari ke 3 (p <0,05). Hasil viabilitas sel seperti terlihat pada Tabel 3, terungkap bahwa viabilitas sel preosteoblas 7F2 tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,78% (99,8%), sedangkan yang terendah terdapat pada konsentrasi sebesar 100% (3,94%). Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok konsentrasi pada hari ke 7 (p <0,05).
PNE 1% dengan ukuran partikel 151,28 hingga 182,2 nm dan potensi zeta −32,76 mV digunakan. PNE 1% ditemukan tidak beracun bagi 7F2 sel pra-osteoblas dengan batas toksisitas sel pada konsentrasi 1,56%. Namun, penelitian lebih lanjut masih diperlukan untuk menyelidiki osteoinduktivitas dan proliferasi garis sel pra-osteoblas setelah pemberian PNE 1%
Link:
Penulis: Ratri Maya Sitalaksmi
baca juga: /pemanfaatan-ekoenzim-sebagai-larvasida-aedes-aegypti/
