Candida albicans adalah jamur komensal oportunistik yang ditemukan pada orofaring, saluran pencernaan dan vagina, serta kulit pada beberapa orang sehat dan individu sehat. Jamur ini dapat bersifat patogen dan menimbulkan penyakit jika sistem imun terganggu. Respon imun bawaan terhadap C. albicans mengenali PAMPs C. albicans oleh sel imun bawaan, yaitu makrofag dan sel dendritik. Mannan terkait-O, komponen dinding sel C. albicans yang paling banyak dapat dikenali oleh TLR4. Pengikatan ini menginduksi aktivasi NF-魏B, kemudian NF-魏B meningkatkan regulasi transkripsi prekursor tidak aktif pro-IL-1尾, pro-IL-18. Dinding sel C, albicans juga memicu pembentukan inflammasome. Inflammasome memulai aktivasi pro-caspase-1 menjadi caspase-1, dan enzim ini memecah pro-IL-18, 24 kDa dan menjadi IL-18 bioaktif 18 kDa yang matang. IL-18 menginduksi sekresi ekspresi IFN纬 dan IL-18R伪. IFN纬 mengaktifkan makrofag untuk menghasilkan sitokin inflamasi. IL-18 dapat secara langsung mengaktifkan sekresi kemokin oleh makrofag dan mengaktifkan sel NK untuk menginduksi sekresi IFN纬 atau merangsang sitotoksisitas yang dimediasi perforin dan FasL. IL-18 mengaktifkan Th2 untuk menghasilkan IL-13 dan IL-4. IL-18 memicu peningkatan molekul adhesi sel, sintesis oksida nitrat, dan produksi kemokin. IL-18 menginduksi ekspresi ICAM-1 pada myeloid sel dan ekspresi VCAM-1 dalam sel mikro endotel atau fibroblas sinovial. Mengingat peran penting IL-18 dalam menginduksi keradangan maka peneliti melakukan studi invivo dengan menginjeksi dinding sel C. albicans secara intraperitonial tikus wistar betina untuk membuktikan adanya peningkatan IL-18 dan peran NLPR3 inflamasome dalam peningkatan tersebut.
Metode isolasi dinding sel C. albicans yang digunakan pada penelitian ini adalah kombinasi fisikmenggunakan ultrasound homogenizer, kimia dan termal, diadaptasi dari de Groot, 2004. C. albicans ATCC 10231 dari kultur dicuci dengan H20 dingin dan 10 mM Tris-HCL, pH 7,5. Pada langkah selanjutnya, sel diresuspensi dalam 10 mM Tris-HCl, pH 7,5, dan Ultrasound Homogenizer yang hancur (Cole Parmerseri 4710). Protein yang terikat secara non-kovalen dan kontaminan intraseluler dihilangkan dengan mencuci 1 M NaCl dan diekstraksi dengan 50 mM Tris-HCL pH 7,8 mengandung 2 % SDS, 100 mM NA-EDTA, dan 40m 尾 Mercapetanol, 5 menit 100 掳C, lalu dicuci 3 kali dengan air dan dibeku-keringkan
Tikus wistar jantan dibagi menjadi 2 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol. Pemberian dinding sel C. albicans dilakukan dengan teknik modifikasi yang diadaptasi dari Yoshikane, 2014. Paparan C. albicans diberikan secara intraperitonia.l Kelompok P1 dengan 8 mg/kg BB dan kelompok P2 dengan dosis 16 mg/kg BB. Pemberian dinding sel C. albicans selama 5 hari berturut-turut dalam 2 siklus dengan selang waktu 23 hari. Kelompok kontrol disuntik dengan injeksi aquadest pro. Tikus di-eutanasia 24 jam setelah injeksi terakhir. Darah intracarial diambil untuk pengukuran kadar IL-18 dan ekspresi NLRP3 diukur dengan flossitometri pada makrofag intraperitoneal.
Uji regresi bertahap tidak menunjukkan hubungan sebab akibat yang signifikan antara ekspresi inflamasiom NLRP3 dan IL-18 (p > 0,05). Hasil ini menyiratkan mekanisme aktivasi IL-18 pada penelitian ini tanpa melibatkan aktivasi NLRP3-inflammasome. Analisis regresi bertahap menunjukkan bahwa peningkatan kadar IL-18 tidak terjadi karena peningkatan ekspresi inflamasiom NLRP3. Mekanisme produksi IL-18 tanpa melibatkan NLRP3-inflammasome juga telah ditemukan pada beberapa penelitian. Sel dendritik murine prima (DC) merespons stimulasi p60 dengan produksi spesies oksigen reaktif (ROS) dan sekresi IL-1尾 dan IL-18. Inhibitor produksi ROS menghambat sekresi IL-1尾 tetapi tidak mengganggu sekresi IL-18. Lebih lanjut, DC dari murine knockout caspase-11 (casp11) 128S6 gagal dalam sekresi IL-1尾 sebagai respons terhadap p60 tetapi sepenuhnya responsif terhadap sekresi IL-18. Jadi, aktivasi IL-18 dapat terjadi tanpa melibatkan inflamasiom NLRP3
Dari hal tersebut dapat disimpulkan dinding sel C. albicans terbukti dapat meningkatkan kadar IL-18 dalam plasma darah namun peningkatan tersebut tidak tergantung pada kadar NLRP3 inflamasome. Peningkatan IL-18 ini dapat menjelaskan hubungan antara infeksi C. albicans dengan penyakit keradangan yang etiologi masih belum dapat dijelaskan secara tuntas. IL-18 memiliki banyak peran dalam patogenesis banyak penyakit sistemik, misalnya penyakit radang usus, sindrom metabolik dan diabetes tipe 2, aterosklerosis dan infark miokard, penyakit paru-paru (Asma, Penyakit Paru Obstruktif Kronis, cidera Paru Akut), sepsis, sindrom hemofagositik, pada artritis idiopatik remaja sistemik/Penyakit Still yang menyerang orang dewasa. IL-18 dapat menginduksi aktivitas sel imun inflamasi dan sitotoksik, yang menyebabkan autoimunitas. Peningkatan kadarnya telah dilaporkan dalam darah pasien dengan beberapa penyakit terkait kekebalan tubuhpenyakit, termasuk rheumatoid arthritis, lupus eritematosus sistemik, diabetes mellitus tipe I, dermatitis atopik, psoriasis, dan penyakit radang usus.
Judul asli : The NLRP3 Inflammasome-Independent IL-18 Elevation Induced by Candida Albicans Cell Wall
Penulis : Aries Muharram, Erna Sulistyani, Iin Eliana Triwayuni, Yani Corvianindya Rahayu, Gondo Mastutik
Identitas Jurnal: Trends In Sciences 2023; 20(11): 6888
Link:
