Penyakit jantung bawaan (PJB) asianotik seperti seperti cacat septum atrium (ASD) dan septum ventrikel cacat (VSD) adalah PJK yang paling umum (50% dari seluruh penyakit PJK).Biasanya, tambalan dari bahan prostetik atau perikardium dijahit di atas ASD atau VSD untuk menutupnya sama sekali. Sayangnya, bahan yang digunakan untuk menambal perbaikan atau rekonstruksi memiliki keterbatasan seperti mereka ketidakmampuan untuk tumbuh, memperbaiki, dan merombak. Aneurisma pembentukan, trombosis, dan ketidakmampuan patch untuk tumbuh atau berubah bentuk merupakan sumber morbiditas yang penting dan kematian setelah perbaikan atau rekonstruksi struktur kardiovaskular, terutama pada anak-anak dan dewasa muda. Rekayasa jaringan mempunyai potensi untuk menjadi pendekatan inovatif in vitro yang penting untuk penggantian bedah cacat bawaan yang dimaksudkan. Dengan mentransplantasikan turunan adiposa manusia multipotensial sel induk mesenchymal (hAMSCs) menjadi yang banyak digunakan patch polytetrafluoroethylene (PTFE), kami mencoba yang baru solusi untuk bahan prostetik bedah. Fibronektin sebagai protein matriks ekstraseluler (ECM) ditambahkan meningkatkan sel ke sel dan permukaan sel ke lampiran tambalan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mempelajari dampak fibronektin untuk meningkatkan hAMSC sel-ke-sel kepatuhan dan perlekatan permukaan sel ke tambalan Patch PTFE untuk menutup ASD atau VSD.
Patch Polytetrafluoroethylene (PTFE) umumnya digunakan selama penutupan bedah atrium cacat septum (ASD) dan cacat septum ventrikel (VSD). Namun patch ini memiliki beberapa keterbatasan seperti ketidakmampuannya untuk tumbuh atau berubah bentuk, terutama pada anak-anak dan dewasa muda. Untuk mengatasi keterbatasan ini, kami telah mencoba menggunakan fibronektin dan turunan adiposa manusia sel induk mesenchymal (hAMSCs) di patch PTFE.
Tujuan studi ini untuk memahami dampak fibronektin dalam meningkatkan kepatuhan sel-ke-sel hAMSC perlekatan permukaan sel ke tambalan ke dalam tambalan PTFE yang digunakan dalam penutupan bedah ASD atau VSD. HAMSC disepuh dan difiksasi dengan 15 mL metanol dan kelompok diferensiasi (CD) 90+, CD105+, dan CD45 − antibodi diberi label dengan fluorescein isothiocyanate, dibilas dengan larutan salin yang mengandung fosfat, dan dianalisis di bawah mikroskop fluoresensi. Larutan fibronektin (0,1%) digunakan untuk merendam perancah tempel selama kurang lebih 2 jam durasi dan kemudian dikeringkan selama 20 menit pada kelompok perlakuan. Sampel diperiksa dengan pemindaian mikroskop elektron (SEM).
Pemeriksaan SEM menunjukkan perlekatan sel tidak sempurna bahkan setelah 10 hari di dalam kelompok kontrol. Sebaliknya, kelompok perlakuan menunjukkan lebih banyak sel yang menempel permukaan tambalan. Terapi sel induk dalam rekayasa jaringan telah dilakukan dengan strategi yang menjanjikan untuk merekonstruksi, memperbaiki, atau mengganti jaringan pada cacat bawaan. Komponen penting adalah sel yang digunakan, bahan perancah, dan molekul pemberi sinyal yang mendukung. HAMSC telah direkomendasikan karena memiliki diferensiasi yang baik kapasitas, aksesibilitas mudah dalam hal isolasi prosedur, dan kemampuan proliferasi, dan ternyata tidak berubah sepanjang hidup pasien. Oleh karena itu, hAMSC digunakan dalam penelitian ini karena keunggulannya dibandingkan tulang MSC sumsum. Banyak faktor yang mempengaruhi kemanjuran protein terlarut seperti fibronektin pada permukaan termasuk jaraknya antara protein dan substratum, langsung lingkungan sekitar domain fungsional, dan konfigurasi protein dan sekundernya struktur. Faktor-faktor tersebut dapat mempengaruhi aksesibilitas bagian aktif dari protein ke sel, aktivitas peptida, dan topografi permukaan. Patch PTFE memiliki efisiensi dan kesulitan penyemaian yang rendah untuk menahan sel, dan ini mungkin disebabkan oleh karakter tambalan yang hidrofobik dan ringan sendiri, tidak membiarkannya tenggelam dalam media budaya.
Adsorpsi atau imobilisasi protein ECM tertentu Oleh karena itu, dapat digunakan untuk meningkatkan perlekatan sel. Untuk meniru lingkungan in vivo, dimurnikan komponen ECM sering digunakan dalam laboratorium untuk melapisi kultur sel dengan plastik atau kaca untuk meningkatkan adhesi sel. Studi kultur sel menggunakan sel otot polos arteri koroner manusia ke perancah poliuretan menunjukkan hal itu perancah terkonjugasi fibronektin telah meningkatkan sel keterikatan dan kedalaman infiltrasi dibandingkan dengan perancah tanpa konjugasi fibronektin dan dengan perancah yang hanya berisi fibronectin diserap pada kultur sel 4 hari. Studi ini menunjukkan bahwa hAMSC yang tidak terdiferensiasi dimasukkan ke dalam patch tersebut perancah dapat menempel lebih banyak dengan penambahan fibronektin. Pada di sisi lain, kelompok kontrol menunjukkan aslinya struktur tambalan daripada yang homogen dan permukaan konfluen.
Penelitian kami menunjukkan bahwa fibronektin memiliki dampak positif pada perlekatan hAMSC diunggulkan ke patch PTFE. Sifat-sifat ini, dikombinasikan dengan perkembangannya plastisitas, telah menghasilkan minat yang luar biasa dalam pengobatan regeneratif.
Penulis : I. Gde Rurus Suryawan; Ratri, Anudya Kartika; Andrianto Andrianto; Meity Ardiana; Ricardo Adrian Nugraha
Link :
